出現(xiàn)污染后，我們首先考慮可能是試劑的污染，更換新批號的HBV試劑重新檢測后，結(jié)果仍為全部標(biāo)本陽性。 將HBV標(biāo)本拿到其他正規(guī)的PCR實驗室檢測，結(jié)果標(biāo)本中陰、陽性結(jié)果都有，陰性對照是陰性，陽性對照是陽性，說明標(biāo)本沒有被污染將兩種批號的HBV試劑拿到其他正規(guī)的PCR實驗室檢測，也顯示試劑沒有問題。 我實驗室用消毒液擦拭工作臺面后，打開所有的紫外燈照射一天，將所使用微量進(jìn)樣器、離心管、槍頭、手套、記號筆、記錄本等都更換掉，再將HBV標(biāo)本進(jìn)行檢測，結(jié)果全部標(biāo)本仍然為陽性。 用消毒液擦拭工作臺面后，打開所有的紫外燈照射一天，將HBV標(biāo)本重新檢測，同時設(shè)置了兩個陰性對照(A和B)，A 陰性對照為將試劑的反應(yīng)管從試劑盒中拿，打開反應(yīng)管的蓋子，在空氣中暴露10 min，蓋上蓋子，上機(jī)檢測；B陰性對照為將試劑的反應(yīng)管從試劑盒中拿，不開蓋子，直接上機(jī)檢測。結(jié)果是全部標(biāo)本和A陰性對照為陽性，而B陰性對照為陰性。 至此，雖然還查找不到污染源是什么，但有一點可以肯定，PCR實驗室污染是氣溶膠擴(kuò)散而引起的后來經(jīng)過調(diào)查，發(fā)現(xiàn)污染是由于本室工一位工作人員在打掃實驗室衛(wèi)生時，用擴(kuò)增區(qū)的掃笤和拖把打掃了標(biāo)本制備區(qū)的衛(wèi)生引起。 在確定了污染的原因后，我們就開始著手排除污染，每天都打開整個PCR 實驗室的門窗和排氣扇，讓整個實驗室通風(fēng)，用消毒液擦拭整個PCR實驗室，打開所有的紫外燈照射。 每隔3 d按3．5步驟檢測一次，一直這樣處理了一個月，A陰性對照才轉(zhuǎn)為陰性。連續(xù)檢測三次A和B陰性對照，每次結(jié)果都均為陰性，才確定PCR實驗室恢復(fù)正常。 通常我們對PCR實驗室污染的預(yù)防是采取隔離不同操作區(qū)、分裝試劑、改進(jìn)實驗操作等規(guī)則，對污染的處理是用稀鹽酸擦拭或浸泡；紫外線照射法等。而對于實驗室的通風(fēng)方面沒有給予足夠的重視，為了防止實驗區(qū)間之間的相互污染，各個實驗區(qū)間都是盡可能的密閉，從而使得實驗室出現(xiàn)PCR產(chǎn)物殘留污染的幾率增大。 從本次PCR實驗室污染排除的過程來看．我覺得污染得以排除的一個關(guān)鍵是通風(fēng)。適當(dāng)?shù)慕o予實驗室通風(fēng)，可起到空氣稀釋的作用，有利于PCR產(chǎn)物殘留量的減少，加快實驗室污染的排除。